T、B淋巴细胞的体外培养方法
1、T淋巴结细胞身体之外培养法:
(1)T淋巴结细胞转换实验(T细胞繁殖实验),T淋巴结细胞与某类 ** 物在身体之外培养时,细胞内DNA和蛋白质合成提升,发生一系列增长性转变:细胞增加,胞浆增多,发生空泡化等
(2)T细胞受体的细胞毒实验,基本原理:当铬酸钠标识的靶细胞与效用细胞一同培养时,靶细胞被Tc细胞破坏力毁坏后, 51Cr即释放出来到培养液中,因而培养液中51Cr含量体现被淋巴结细胞破坏力的靶细胞数与水平。
(3)混和淋巴结细胞培养,基本原理;因为MLR中淋巴结细胞接纳相同异形抗原HLAⅡ类抗原中D和DP抗原的 ** 而产生活性、繁殖,造成类型很多的细胞因素。2个个人间HLA抗原差别水平越大,反映越明显 . ** 抗原:以另一个体的淋巴结细胞做为抗原 ** 物
(4)LAK细胞的制取,添加IL-2或CD3单抗
(5)K细胞毒副作用实验,常见的办法有溶血症空斑法和51Cr标记测定法
(6)T淋巴结细胞长期性培养,选用以下方式:添加500U/ml IL-2(T细胞细胞生长因子),3天换液1次;抗原 ** ;添加白细胞介素2
2、B细胞身体之外培养:
(1)B细胞造成Ig作用的检验,在PWM的 ** 及T细胞的协助下,可转换为浆细胞并造成多克隆抗体。测量培养上清中的Ig含量,可观查B细胞造成Ig的作用
(2)EB病毒转换的B淋巴结细胞 ,EB病毒具备B细胞丝裂原功效,可推动B细胞繁殖,并可使B细胞永世化
(3)CD40L的B细胞培养管理体系,身体之外经CD40L的配基化功效后,可让B细胞得到相对应的繁殖数据信号而在离体增加
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